細胞培養的相關知識分享

　　細胞培養技術又稱單細胞分離培養技術，即在體外將一個細胞從細胞群中分離出來，使其能夠復制成一個新的細胞群培養體系。由單個細胞形成的細胞群稱為克隆，純化后的細胞群稱為細胞系，即細胞培養。
 

　　各細胞的遺傳和生物學特性非常相似和一致，有利于不同細胞群形態和功能的比較研究。
 

　　菌落(克隆)計數：在倒置顯微鏡下觀察、計數直徑大于75μm或含有50個以上細胞的克隆。
 

　　血細胞計數板細胞數/ml=4個大正方形細胞總數/4×104
 

　　細胞計數器/細胞分析儀(凱西，德國)
 

　　細胞活力0.4%臺盼藍染色
 

　　MTT法可用于評價細胞的相對數量和活性
 

　　細胞的冷凍保存和復蘇：
 

　　低溫保存：4℃緩慢冷凍60分鐘(可延長)
 

　　-20℃下40-60分鐘(不能太長，可以跳過*)
 

　　-80℃(半年內轉液氮/過夜)程控冷卻儀表1-3℃/min轉液氮
 

　　復蘇：38℃溶解，注意水面不能接觸凍存管蓋邊
 

　　上清液以低速(500轉/分)離心除去，加入相同的培養基，輕輕吹掃上清液，接種于適當大小的培養瓶中。